豚エンテロウイルスの遺伝学的再分類および迅速検出法の開発

タイトル	豚エンテロウイルスの遺伝学的再分類および迅速検出法の開発
担当機関	家畜衛生試験場
研究課題名
研究期間	1989～1999
研究担当者
発行年度	1999
要約	豚エンテロウイルスは，遺伝学的に３グループに再分類され，うち１グループについては，ピコルナウイルス科の新たなウイルス属として独立させる必要が示唆された。また，同グループの株を迅速に検出できるRT-PCR法を開発した。
要約(英語)	Genetic diversity of porcine teschoviruses (PTVs; renamed from porcine enterovirus 1; PEV-1) and porcine enteroviruses (PEVs) was studied. The nucleotide and derived amino acid sequences from the RNA-dependent RNA polymerase (RdRp) region, the capsid VP2 region and the 3' non-translated region (3'NTR) were studied, and compared with other picornaviruses. The data were obtained by sequencing PCR amplicons and 3'RACE products using the primers based on the sequences of PTV (porcine teschovirus) and the available PEV (porcine enterovirus) strains. To construct the PTV primers, the majority of the genomic sequence of the PTV reference strain Talfan was determined. Phylogenetic analysis of RdRp/VP2 and the secondary structure analysis of 3'NTR indicated that PEVs should be re-classified genetically into three groups: One group that should be assigned to PTVs and two PEV subspecies represented by PEV-8 V13 strain and PEV-9 UKG410/73 strain. (Lab. of Pathogenic Viruses, Department of Virology TEL +81-***********)
背景・ねらい	豚エンテロウイルス(PEV)は，下痢，繁殖障害，脳脊髄炎を呈する豚のみでなく，無症状豚からもしばしば分離される。これまで，中和試験により少なくとも１３の血清型に分けられているが，血清型と病型の関係は明らかではない。PEV性脳脊髄炎の原因ウイルスとして知られているTeschen株，Talfan株はPEV-1に分類されているが，脳脊髄炎を呈さない豚からも多くのPEV-1（SF12株など）が分離されており，血清型別に代わる遺伝子型別法が求められてきた。また，病性鑑定においては，その分離・同定に多大な労力や時間が必要とされてきた。本研究では，PEVの遺伝学的解析を行うとともに，それに基づく迅速な検出・同定法の開発を試みた。
成果の内容・特徴	PEV-1 Talfan株のほぼ全塩基配列を明らかにし，他のピコルナウイルスとの比較を行ったところ，相同性の低さおよびゲノム構造の違いから，ピコルナウイルス科の新たなウイルス属として再分類される必要があることが示唆された。 RT-PCR法により得たPEV全血清型代表株の部分的な遺伝子断片の塩基配列を比較　した結果，PEVは３つの遺伝学的グループに分類された。（図１，２） 上記３グループのうち，Talfan株を含むグループについて特異的に検出できるRT-PCR法を開発した。
成果の活用面・留意点	Talfan株を含むグループについては，1999年国際ウイルス分類委員会(ICTV)において，ピコルナウイルス科テシオウイルス属として再分類されることが承認された。 本研究で開発したRT-PCR法の有効性を確認するために，今後数多くの野外株に応用し，その結果を蓄積していく必要がある。
URL	http://agriknowledge.affrc.go.jp/RN/3010016107
カテゴリ	ICT 繁殖性改善 豚